MYLK4-NanoLuc® Fusion Vector

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Kinase Fusion Vector for NanoBRET® Target Engagement

  • Transfection-ready DNA to express full-length MYLK4 kinase fused to NanoLuc® Luciferase
  • Measures kinase target engagement in live cells
  • Use with NanoBRET® TE Intracellular Kinase Assay, Adherent Format protocol

Presentación

Catalog number selected: NV3751

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MYLK4-NanoLuc® Fusion Vector
20μg
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Expresar fusiones NanoLuc®-Kinasa de longitud completa en células de mamífero

El vector de fusión MYLK4-NanoLuc® contiene la región codificante de la luciferasa NanoLuc®  fusionada al terminal C de la quinasa humana MYLK4 . Está diseñado para su uso con el protocolo NanoBRET™ Target Engagement (TE) Intracellular Kinase Assay, Adherent Format, en el que el plásmido puede transfectarse en varias líneas celulares para el análisis de la participación de la diana MYLK4 . Los vectores de fusión NanoLuc® luciferase kinase se suministran listos para la transfección. El promotor CMV dirige la expresión de la proteína de fusión quinasa NanoLuc® de longitud completa. 

Detalles del vector:

  • Nombre genético: MYLK4
  • Secuencia
  • Ensayo recomendado: NanoBRET™ TE Cinasa intracelular, K-10
  • Ejemplo de datos usando Tracer: K-10

Acerca de los nombres de los vectores de fusión de quinasa

La colocación de NanoLuc® a 5´ o 3´ del gen de la quinasa está optimizada para su uso con los ensayos NanoBRET™ TE y se refleja en el nombre del vector. Por ejemplo, NanoLuc®-quinasa implica que NanoLuc® está a 5´ del gen de la quinasa (en el extremo N-terminal de la quinasa). Del mismo modo, quinasa-NanoLuc® implica que NanoLuc® está 3´al gen de la quinasa (en el C-terminal de la quinasa).

Ensayos de quinasa intracelular NanoBRET™ Target Engagement (TE)

Los ensayos de quinasa intracelular NanoBRET™ TE pueden analizar la afinidad de los compuestos de ensayo mediante el desplazamiento competitivo de un trazador fluorescente NanoBRET™ unido reversiblemente a una proteína de fusión NanoLuc®-quinasa en células. La introducción de compuestos de ensayo competidores provoca una disminución dependiente de la dosis de la señal NanoBRET™ para estimar la afinidad intracelular contra la proteína diana. El trazador NanoBRET™ utilizado viene determinado por la elección del vector de fusión de quinasas NanoLuc®. La tabla Kinase Vector Selection muestra qué ensayo NanoBRET™ Tracer es correcto para cada vector de fusión de quinasas.

Especificaciones

Contenido

Item Part # Presentación Concentración

MYLK4-NanoLuc® Fusion Vector

NV375A 1 × 20μg 1μg/μl

Certificado de Análisis

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Use Restrictions

For Research Use Only. Not for Use in Diagnostic Procedures.

Condiciones de Almacenaje

BB

Patentes y Exclusiones

NanoLuc® ORF TE Vector Limited Use Label License

BY USE OF THIS PRODUCT, RESEARCHER AGREES TO BE BOUND BY THE TERMS OF THIS LIMITED USE LABEL LICENSE. If researcher is not willing to accept the terms of this label license, and the product is unused, Promega will accept return of the unused product and provide researcher with a full refund.

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In addition, researcher must:
(1a) use Nano-Glo®-branded luminescent assay reagents (LARs) for all determinations of luminescence activity of this product; or
(1b) contact Promega to obtain a license for use of the product with LARs not manufactured by Promega.

For uses of this product (NanoLuc® ORF Vector) for energy transfer (such as bioluminescence resonance energy transfer), researcher must:
(2a) use NanoBRET®-branded luminescent assay reagents (LARs; e.g., NanoBRET® Nano-Glo® Substrate), Intracellular TE Nano-Glo® Substrate/Inhibitor or Intracellular TE Nano-Glo® Vivazine®/Inhibitor for all determinations of luminescent activity; and
(2b) use NanoBRET®-branded energy acceptors (e.g., NanoBRET® tracers, NanoBRET® dyes, BRET-optimized HaloTag® ligands) for all determinations of energy transfer activity; or
(2c) contact Promega to obtain a license for use of the product for energy transfer assays using energy acceptors not manufactured by Promega. No license is needed if the energy transfer acceptor is a genetically encoded autofluorescent protein.

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U.S. Pat. Nos. 8,557,970, 8,669,103, 9,777,311, 9,840,730, 9,951,373, 10,233,485, 10,633,690, 10,774,364, 10,844,422, 11,365,436, 11,661,623, 11,667,950; European Pat. Nos. 2456864, 2635595, 2990478, 3181687, 3409764; Japanese Pat. Nos. 6038649, 6155424, 6227615, 6374420, 6539689; and other patents and patents pending.

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