Cuantificación de proteínas

Determinar la abundancia de una proteína celular es fundamental para comprender la biología celular en estudio. En los ensayos celulares, el objetivo suele ser comparar la abundancia relativa entre diferentes condiciones experimentales, en lugar de medir los niveles absolutos de proteínas. Existen muchos métodos para cuantificar la abundancia de proteínas celulares, incluidos los ensayos colorimétricos, fluorescentes y bioluminiscentes. Estos enfoques se basan a menudo en la separación por electroforesis en gel seguida de tinción o Western blot basado en anticuerpos. El método de detección ideal se determina en función de factores como los anticuerpos disponibles, el rango dinámico cuantitativo requerido, las necesidades de rendimiento y el nivel de expresión de la proteína. La sensibilidad de un método debe ajustarse a la proteína que se desea detectar. Por ejemplo, las proteínas expresadas a niveles más altos en las células pueden medirse utilizando métodos colorimétricos menos sensibles. Sin embargo, para las proteínas de baja abundancia, pueden ser necesarios métodos bioluminiscentes que puedan cuantificar hasta cantidades nanomolares. Teniendo en cuenta estos factores, podrás determinar qué métodos experimentales son los más adecuados para cuantificar los niveles de expresión de proteínas celulares.