TAQ DNA POLYMERASE catalog #M1661

Durante muchos años, Promega ha sido un proveedor líder de Taq DNA Polymerase para laboratorios de investigación reconocidos en el ámbito mundial. Usted puede depender de Promega Taq para realizar de forma consistente y confiable sus métodos de PCR rutinarios. Nuestra Taq DNA Polymerase se proporciona en dos formas: Como una enzima estándar y bajo nuestra forma patentada de calidad para secuenciamiento la cual contiene una actividad de exonucleasa de 5'-3 'muy baja. Esta polymerasa es una enzima termoestable que cataliza la incorporación de nucleotidos para crear ADN doble en la presencia de Mg2+ a temperaturas elevadas, y permanece funcional incluso después de la incubación a 95°C.
 

Los "PCR Core Systems" catalog #M7660

Para investigadores novatos en PCR y para aquéllos que quieren una iniciación en PCR rápida, y con componentes confiables que han sido probados en amplificación, Promega tiene dos nuevos Sistemas de PCR. Nuestros sistemas "PCR Core System I" y "PCR Core System II" ofrecen una combinación de reactivos convenientes, un Boletín Técnico que contiene protocolos simples y una guía completa con respuestas que le permitirán obtener resultados confiables de PCR. Ambos sistemas incluyen nuestra Taq DNA Polymerase nativa y "PCR Nucleotide Mix", junto con "buffers" de alta precisión y Cloruro de Magnesio. El "PCR Core System II" también incluye un Control Positivo para ADN de Plásmidos y un Control Positivo para los "primers", proporcionando así una mayor confianza en el control de la reacción de PCR.
 

Tfl DNA POLYMERASE catalog #M1945

Escoja Promega Tfl DNA Polymerase como una alternativa a Taq DNA Polymerase. La enzima es una polymerasa termoestable con características similares a Taq DNA Polymerase. La enzima cataliza la incorporación de nucleotidos para crear ADN doble en la presencia de Mg²⁺ a temperaturas elevadas, y permanece funcional incluso después de incubación a 95°C.

PFU DNA POLYMERASE catalog #M7745

Cuando su aplicación requiere alta fidelidad, Pfu DNA Polymerase es la mejor opción en enzimas. Esta enzima termoestable de alta fidelidad ofrece la tasa más baja de error entre las polymerasas de ADN disponible en el mercado. La Pfu DNA Polymerase de Promega, combinada con el "buffer" optimizado para alta fidelidad y rendimiento, proporciona la reacción más exacta y consistente en PCR. La exactitud de Pfu DNA Polymerase ha sido reportada como 7.7 x 10⁵ nucleotidos (Cline et al., 1996) lo cual iguala una exactitud dos veces mayor que la Vent^® Polymerase y 6 veces superior que Taq DNA Polymerase. La Pfu DNA Polymerase se aísla como una proteína nativa de Pyrococcus furiosis (banda DSM3638).
 
La enzima de Promega puede usarse directamente en cualquier protocolo que requiera el uso de Pfu DNA Polymerase. La concentración de la enzima y "buffer" de reacción ya han sido optimizados para la mayoría de los protocolos en PCR de alta fidelidad que ha sido publicados.
 
Esta enzima se recomienda para el uso en PCR, reacciones de extensión de primers y otras aplicaciones que exigen alta fidelidad, incluyendo cloning, expresión de ADN y análisis de mutaciones.
 

TLI DNA POLYMERASE catalog #M7101

La clonación de productos de PCR requiere extra fidelidad de polymerasa para corregir errores de síntesis. Tli DNA Polymerase también exhibe la robustez termal extrema requerida cuando los experimentos exigen ciclos extra.
 
La enzima cataliza la incorporación de nucleotidos para crear ADN doble en la presencia de Mg²⁺ a temperaturas elevadas, y permanece funcional incluso después de la incubación a las 100°C. La enzima tiene una actividad exonucleasa 3'-5 ' integrada o función de corrección.

TaqBead^TM Hot Start Polymerase catalog #M5661

TaqBead^TM Hot Start Polymerase proporciona un método fácil, de un solo paso para realizar la amplificación de hot start. Cada cuenta de cera contiene Taq DNA Polymerase (Buffer B) previamente medida, manteniendo a la enzima inactiva hasta calentarla a mas de 60°C. Realizar un PCR "hot start" tiene muchas ventajas sobre un PCR "cold start", incluyendo la reducción de productos de amplificación no específicos, detección mas sensitiva de genes de copia baja y mejor PCR múltiple. El formato sin barrera permite pipetear mas fácilmente después de la reacción y puede usarse sin la cubierta de aceite cuando se usa un termociclador de tapa caliente. Los "hot starts" son particularmente útiles cuando el ADN que se desea amplificar es mayor de 1kb.

Access RT-PCR System catalog #A1250

Escoge el sistema de Access RT-PCR de Promega como la solución más fácil y sensible para RT-PCR. El Access RT-PCR de Promega ofrece la alta sensibilidad de los sistemas de detección de 2 enzimas, sin sacrificar la conveniencia de protocolos de una sola enzima. La acción superior de este sistema se debe a la combinación de AMV Transcriptasa Reversa y Tfl DNA Polymerase en 5X Reaction Buffer que acompaña los sistemas.
 

El Sistema de Transcripción al Reverso catalog #A3511

El Sistema de Transcripción Reversa proporciona reactivos que eficazmente pueden revertir la transcripción de ARN en cADN en quince minutos. El cADN generado usando este sistema pueden ser usado directamente en reacciones múltiples de PCR usando la Taq DNA Polymerase de Promega. La AMV Transcriptasa Reversa sintetiza uno de los alelos de cADN usando como templado ARN total o poly(A)+. Tanto el Oligo(dT)₁₅ como los "hexamers al azar", están incluidos permitiendo la síntesis del cADN prácticamente de cualquier material de ARN.
 

Tth DNA POLYMERASE DNA POLYMERASE catalog #M2101

Escoja Tth DNA Polymerase cuando la estructura secundaria de ARN requiere temperaturas extremas de transcripción reversa. Tth DNA Polymerase es también una polymerasa de ADN ideal y puede usarse en RT-PCR de una enzima y PCR rutinario.
 
La enzima cataliza la incorporación de nucleotidos para crear ADN doble en la presencia de Mg²⁺ a temperaturas elevadas, y permanece funcional incluso después de incubación a 95°C. La enzima también cataliza la polimerización de cDNA a base de ARN en la presencia de Mn²⁺. La habilidad de Tth DNA Polymerase de invertir la transcripción a temperaturas elevadas, minimiza los problemas encontrados con estructuras secundarias complicadas de ARN, dado que tales estructuras son inestables en reacciones a temperaturas altas. Temperaturas superiores también resultan en aumento en la especificidad de hibridación de primers y en reacciones de extensión.
 

AMV Transcriptasa Reversa catalog #M5108

Está disponible en concentraciones de 5-10u/ml o 20-25u/ml. La AMV-RT puede procesar transcripciones de ARN con aun mayor grado de estructura secundaria que la M-MLV. Esto se debe al hecho de que la AMV se mantiene activa por encima de temperaturas notablemente superiores (hasta 48^oC).
 

M-MLV Transcriptasa Reversa catalog #M1701

Esta enzima contiene una actividad intrínseca de RNase H más débil que la AMV-RT, lo cual es importante para lograr la longitud completa del ADN complementario (>7Kb).
 

M-MLV Transcriptasa Reversa, RNase H^- catalog #M5301

Es una forma mutante del virus de transcriptasa reversa "murine moloney leukaemia". Una mutación fue creada para eliminar la actividad del RNase H la cual esta asociada con todas las transcriptasas reversas nativas. La falta de la actividad de RNase H mejora la síntesis de cADNs largos (>7kb).
 

Primer pairs para RT-PCR catalog #G5740

Los "Primer pairs" de Promega son convenientes y están optimizados para el análisis de expresión de mRNAs específico generado por RT-PCR. Cada "primer pair" incluye un oligonucleotido de 5' y uno de 3', ofrecidos en tubos individuales a una concentración de 100mM cada uno y listos para añadir en la reacción de PCR. La función de los primers ha sido confirmada en un RT-PCR convencional de dos pasos (el Sistema de Transcripción Reversa de Promega, Cat. #A3500) usando ARN total de cerebro de rata. Por favor refiérase a la tabla a continuación para recomendaciones referente a diferentes especies.
 

Primer pair	Tamaño esperado  del producto para PCR	Rata	Humano	Ratón
b-Actin	285bp	√	√	√
BDNF	296bp	√	√	√
ChAT	338bp	√	N.R.	√
CNTF	168bp	√	√	N.R.
gp130	473bp	√	√	√
NGF	189bp	√	√	N.R.
NT-3	176bp	√	√	√
NT-4/5	248bp	√	√	√
p75	663bp	√	√	√
TrkA	690bp	√	√	N.R.
TrkB	664bp	√	√	√
TrkC	1,000bp	√	√	√

√ = positivo para el tamaño esperado N.R. = no recomendable

 

RNasin^® Ribonuclease Inhibitor catalog #N2111

RNasin^® Ribonuclease Inhibitor, desarrollado por Promega, tiene un amplio espectro de propiedades inhibidoras de Rnases incluyendo la inhibición de RNases eukaryoticas del tipo neutro. La proteína de 50kDa ejerce su efecto inhibitorio enlazándose en forma no covalente a RNases en una proporción de 1:1 con una constante de asociación mayor que 10¹⁴. El RNasin^® Ribonuclease Inhibitor de Promega es purificado usando una combinación de intercambio de iones y cromatografia de afinidad, obteniendo un RNasin libre de exo y endonucleasas de ADN y de actividad de RNase. El RNasin^® Ribonuclease Inhibitor de Promega está disponible en los formatos recombinado y natural. ^(d)
 

Puntas de Barrera catalog #A1511

Las Puntas de Barrera ("Barrier Tips") de Promega eliminan las señales falsas y contaminación causadas por aerosoles. Científicamente diseñadas y probadas, las Puntas de Barrera ("Barrier Tips") de Promega, ofrecen rendimiento y economía al trabajar con PCR, isótopos radiactivos, fluidos de tejidos cultivados, muestras infecciosas, y especímenes forenses y de serología. Éstas puntas de barrera están hechas con un plástico inerte de HDPE ultra-hidrófobico que ofrece la efectividad de una barrera auto-sellante con la conveniencia de recuperación de la muestra. En pruebas de retención, este excelente rango de puntas de barrera, eliminó prácticamente toda retención de la muestra en la punta. Las puntas han sido previamente esterilizadas y certificadas como libres de RNase y DNase y han sido diseñadas para encajar perfectamente en la gran mayoría de marcas de pipetas. Todas las puntas vienen empacadas y selladas en bandejas cubiertas.
 

PCR Nucleotide Mix catalog #C1141

Los deoxynucleotidos trifosfatos (dNTPs) de alta calidad son críticos para el éxito de la reacción de polymerasa en cadena (PCR). El PCR Nucleotide Mix es una solución pre-mezclada de sales de sodio de dATP, dCTP, dGTP, y dTTP, cada una en concentraciones de 10mM en agua (pH 7.5). Un microlitro (µl) es suficiente para la amplificación de PCR en una reacción típica de 50 µl.
 

Deoxynucleotidos trifosfatos catalog #U1201

Deoxynucleotidos trifosfatos (dNTPs) de alta calidad son críticos para el éxito de procedimientos como PCR, síntesis del cADN, secuenciamiento y marcación. Los dNTPs de Promega son confiados por investigadores alrededor del mundo debido a su larga trayectoria de calidad y dependencia.
 
Los dNTPs de Promega tienen una pureza mayor de 98% y han sido examinados con todas las enzimas relevantes de Promega para probar su efectividad. Los dNTPs se proporcionan en una concentración de 100mM en agua con un pH de 7.5.
 
Los componentes:
 
      el dATP, 100mM
      el dCTP, 100mM
      el dGTP, 100mM
      el dTTP, 100mM
 
Como parte del esfuerzo continuo de Promega de proporcionar productos de calidad y un servicio al cliente excepcional, recientemente hemos llevado a cabo un nuevo sistema de codificación de color para nuestros dNTPs. Cada dNTP esta ahora fácilmente identificado por el color del anillo en la tapa del tubo patentado por Promega. Esta mejora en el empaque fue diseñada a fin de reducir errores y aumentar la facilidad de uso de los dNTPs individuales y mezclas de dNTP que forman parte de muchos productos de Promega.
 

pGEM^®-T y pGEM^®-T Easy Vector Systems catalog #A3600 & #A1360

Los vectores pGEM^®-T^(b,f) y pGEM^®-T Easy^(b,f) son eficientes en la clonación de productos de PCR. Estos vectores, los cuales se proporcionan como plásmidos linearizados, contienen un residuo de timidina en cada extremo 3'. Esta 3'-T singular cuelga en el lugar de la inserción mejorando enormemente la eficacia en la clonación. Esto se debe a que en los productos de PCR, una sola deoxyadenosina (A) es añadida en los extremos 3' por varias polymerasas termoestables.

El sistema pGEM^®-T Easy Vector incluye mayor conveniencia al agregar sitios para el reconocimiento de EcoR I y Not I flanqueando el sitio de la inserción. Así, la inserción deseada de ADN puede quitarse en una sola digestión de restricción luego de clonar.
 

Wizard^®PCR Preps DNA Purification Systems catalog #A2180

El Wizard^®PCR Preps DNA Purification System^(g) provee una manera fácil y efectiva de purificar los productos de amplificación de las reacciones de PCR para eliminar los primers y primer-dimers. Estos sistemas también pueden usarse para purificar los fragmentos de ADN con geles de agarosa. La purificación pueden procesarse individualmente o en múltiplos de hasta 96 muestras usando uno de los tres "vacuum manifolds" disponibles de Promega.
 

Marcadores 

Promega ofrece una amplia gama de marcadores de peso moleculares para ADN y ARN para uso convencional y electroforesis de gel con pulso. Ahora hemos extendido esta gama mas allá con un juego completo de Escaleras de ADN ("Step DNA Ladders") que son ideales para la clasificación rápida y exacta de los productos de PCR. Cada una de las seis Escaleras de ADN consiste de un número especifico de fragmentos de ADN de punta plana (blunt end) cuyos pesos moleculares van aumentando en incrementos de 10bp, 25bp, 50bp, 100bp, 200bp o 1Kb. Una banda en cada una de las escaleras de 100bp, 200bp y 1kbp es visualizada por bromuro de etidio a una intensidad más alta que las otras bandas, esto sirve como una referencia interna para ayudar en el reconocimiento de las bandas. Un "Blue/Orange Loading Dye" se proporciona con cada uno de nuestros marcadores de ADN.

Nuestra escalera de ADN fluorescente esta diseñada específicamente para ser usada como una norma interna en los sistemas de electroforesis automatizados. La escalera, la cual contiene 16 fragmentos, es ideal para alelos dobles o sencillos de ADN desde 60 bases hasta 400 bases. Una alelo de cada fragmento esta marcado en la punta 5' con un tinte fluorescente y así los fragmentos pueden ser visualizados a 597nm después de excitación a 576nm.
 

Bioquímicos

Cuando se trata de reactivos especializados para biología molecular nosotros siempre hemos ofrecido productos de mayor calidad al mejor precio por su dinero y nuestros bioquímicos no son excepción. Han sido probados rigurosamente para asegurarnos de la ausencia de DNase, RNase y de contaminación de proteasas y han sido sujetos a rigurosas aplicaciones.

Los métodos de RT-PCR representan una de las maneras más sensibles de obtener información cuantitativa de especies poco comunes de ARN. Una de las técnicas más exactas y útiles es el RT-PCR competitivo. Este ensayo se basa en la competencia entre los reactivos de amplificación entre la plantilla que se desea investigar y una cantidad conocida de una plantilla competidora. Vea Kephart, D. (1998) Promega Notes 68, 16 para una discusión en detalle de esta técnica.

Los productos de Promega que pueden ayudarlo a cada paso de este procedimiento complejo son:

• Access RT-PCR System
• pGEM^®-T Easy Vector Systems I y II
• RiboMAX™ Large Scale RNA Production System-T7 ^(d,h)  
• SV Total RNA Isolation System⁽c)
^c) 
• Wizard^® PCR Preps DNA Purification System