S30 T7 High-Yield Protein Expression System
Hohe ProteinmengeBis zu 500µg/ml Protein für verschiedenste Anwendungen |
8 Reaktionen
24 Reaktionen Protokoll (PDF) » |
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SchnellExpression in 1 Stunde |
Maximale ProteinlöslichkeitKeine Bildung von Inclusion Bodies |
ZellreiExpression toxischer Proteine möglich |
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Mit dem E. coli S30 T7 High-Yield Protein Expression System kann Ihr Plasmid-Vektor mit einem T7 Promotor und einer ribosomalen Bindungsstelle in einer Stunde bis zu 500µg/ml Protein exprimieren.
Alle cDNAs wurden in pFN6A Flexi® Vektoren kloniert und
1 μg Plasmid-DNA wurde für die Proteinexpression eingesetzt.
Spur 1: ohne DNA, Spur 2: pFN6A-hRL (Renilla Luciferase),
Spur 3: pFN6A-GFP,
Spur 4: pFN6A-HT2 (HaloTag®),
Spur 5: pFN6A-ßgal (Beta-Galactosidase).
Die exprimierten Proteine können im Coomassie-Gel sichtbar gemacht werden und selbst toxische Proteine können einfach produziert werden.
Das System basiert auf einem Extrakt, der T7 RNA Polymerase für die Transkription enthält und der frei von OmpT und Ion Protease Aktivität ist. Alle anderen benötigten Komponenten sind für die Translation optimiert. Dies führt zu verbesserter Expression und höherer Stabilität des gewünschten Proteins.
Anwendungen:
- Synthese radioaktiv markierter Proteine
- Transkriptions-/Translations-Studien
- Analyse von Proteinstrukturen
- Antikörperproduktion