CellTiter-Blue^® Cell Viability Assay

Multiplexing Durchführung von zwei oder mehr zellbasierter Assays mit der gleichen Probe möglich. Anwendungsbeispiel »	Protokoll (PDF) »	Sensitiv Ca. 400 Zellen im 96-Well-Format (fluorometrische Detektion), abhängig vom Zelltyp
Einfach Direkte Zugabe des Reagenz (1 Pipettierschritt, homogener Assay)	Schnell Kein zusätzlicher Waschschritt erforderlich Robust Hoher Z‘-Faktor	Flexibel Verlängerte Inkubationszeiten möglich. Detektion im Fluorometer (empfohlen) oder Spektrophotometer. Anwendungsbeispiel »
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Der CellTiter-Blue^® Cell Viability Assay ist für Proliferations- und Zytotoxizitätsbestimmung von Zellen in Zellkultur geeignet. Das CellTiter-Blue^® Reagenz enthält den blauen Redoxfarbstoff Resazurin und wird im Verhältnis 1:5 direkt auf die Zellkultur pipettiert. Zusätzliche Wasch- und Pipettierschritte sind bei diesem homogenen Assay nicht notwendig ("add and read").
Nach Zugabe des Reagenz setzen metabolisch aktive Zellen Resazurin in den pink-farbenen, fluoreszenten Farbstoff Resorufin um. Sterbende Zellen hingegen verlieren innerhalb kurzer Zeit ihre metabolische Aktivität und erzeugen somit kein fluoreszentes Signal.
Die Messung des Signals erfolgt nach einer Inkubationszeit von 1 – 4 Stunden. Das Fluoreszenzsignal entspricht der Menge an gebildetem Resorufin und ist direkt proportional zur Anzahl der lebenden Zellen. Das Signal kann entweder im Fluorometer (empfohlene Methode 560Ex/590Em) oder im Spektrophotometer (ELISA-Reader, 570nm) detektiert werden. Das CellTiter-Blue^® Reagenz ist für die Zellen nicht toxisch, so dass flexible Inkubationszeiten möglich sind. Direkt im Anschluss kann noch ein weiterer zellbasierter Assay mit denselben Zellen durchgeführt werden (z.B. Apo-ONE^® Homogeneous Caspase-3/7 Assay).