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Promega GmbH - Pressemitteilung vom 28.03.2000

CellTiter® AQueous One Solution Cell Proliferation Assay

28.03. 2003

Lebende Zellen, gemessen als Zell-Viabilität, haben uns viel zu sagen. Die Zellen werden zunächst mit externen Präparaten, wie Medikamenten oder Chemikalien, behandelt. Anschließend kann sowohl die Anzahl lebender Zellen als auch das Zellwachstum (Proliferation) oder die Toxizität mit Zell-Viabilitäts-Assays bestimmt werden.

Diese Assays sind in der Naturwissenschaft weit verbreitet und werden in einer Vielzahl von Bereichen, wie der Krebsforschung, der Toxikologie, der Prüfung von Kosmetika sowie der Medikamentenentwicklung angewandt. Zell-Viabilitäts-Assays können in Sicherheitstests vor der Freigabe von Konsumgütern als Prüfungsmethode benutzt werden in vitro” Zell-Assays dienen als alternative Methode für gesetzlich vorgeschriebene Tierexperimente und können Tierversuche ersetzen oder die Anzahl der benötigten Tiere verringern, ohne dass die Verbrauchersicherheit beeinträchtigt wird. 

Herkömmliche Assays zur Viabilitäts-Bestimmung basieren auf mühsamer Zellzählungsmethode mit dem Mikroskop oder setzen die Anwendung von umweltgefährdenden radioaktiven Materialien voraus. Zusätzlich benötigen die radioaktiven Assays besondere Arbeitsweisen und Entsorgungsverfahren und sind für den Forscher potenziell gesundheitsschädlich.

Promega spielte bereits 1993 eine bedeutende Rolle in der Entwicklung von Zell-Viabilitäts-Assays mit dem auf MTT-Substanz basierenden CellTiter 96® Non-Radioactive Cell Proliferation Assay. Die neue Technik stützte sich dabei auf die Umwandlung von MTT in ein gefärbtes “Formazan”-Produkt. Diese Umwandlung findet nur in Anwesenheit lebender Zellen statt. Dies war ein äußerst wichtiger Entwicklungserfolg für Promega’s “Signal Transduction” Produktlinie und führte zur Etablierung des Rufs Promega’s als eines der führenden Unternehmen in der zellbasierenden Assay-Entwicklung. 

Mit Erfindung dieser “colorimetrischen” Methode zur Bestimmung der Zell-Viabilität konnten die Ergebnisse einfacher und sicherer erzielt werden. Allerdings befand sich die Technologie noch in einem frühen Stadium. Das Formazan-Produkt war nicht löslich und benötigte daher vor der Messung einen zusätzlichen Lösungsschritt mit einem potenziell gesundheitsschädlichen Lösungsmittel. 

Nach dem Abschluss eines weltweiten Lizenzabkommens für ein neuartiges alternatives Produkt (lösliches MTS) war Promega in der Lage, das weiterentwickelte CellTiter 96® AQueous Non-Radioactive Cell Proliferation Assay anzubieten. Durch die Kombination von MTS mit der “PMS”-Reagenz entfiel die Notwendigkeit eines zusätzlichen Lösungsschrittes, während gleichzeitig die Assay-Leistung erhöht wurde.

Der Austausch der “PMS”-Reagenz durch die stabilere “PES”-Reagenz gilt als nächster Qualitätssprung in der Produktlinie und ermöglicht die Kombination von Reagenz und MTS in einer einzigen stabilen Lösung, welche direkt zu den Proben gegeben werden kann. 

Dieses System, erhältlich  als Promega’s CellTiter 96® AQueous One Solution Cell Proliferation Assay, erlaubt die Vereinfachung des Reaktionsablaufs hin zu einem Einzelschrittverfahren. Dieser nichtradioaktive, hochleistungsfähige Assay bietet einfache Handhabung und schnelle Ergebnisse, was diesem Assay zu einer hervorragenden Lösung für Hochdurchsatz-Anwendungen wie die Medikamentenentwicklung macht.

 

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