|
pGL4.23[Luc2/minP] Vector
pGL4.24[Luc2P/minP] Vector
pGL4.25[Luc2CP/minP] Vector
pGL4.26[Luc2/minP/Hygro] Vector
pGL4.27[Luc2P/minP/Hygro] Vector
pGL4.28[Luc2CP/minP/Hygro] Vector
pGL4.29[Luc2P/CRE/Hygro] Vector
pGL4.30[Luc2P/NFAT-RE/Hygro] Vector
Die neuen pGL4-Luciferase-Reportergenvektoren sind
optimal für die Expression in Säugerzellen geeignet.
Die Vektoren enthalten jeweils das Luciferasegen des
Leuchtkäfers Photinus pyralis (luc2).
pGL 4.23-pGL4.28 besitzen direkt upstream von
luc2 einen Minimal-Promotor minP
bestehend aus einer Minimal-TATA-Box. Das gewünschte
Responseelement kann direkt in die Multikloningsite
kloniert werden. pGL4.29 [luc2P/CRE/Hygro]
enthält drei Tandem CRE-Sequenzen und pGL4.30 [luc2P/NFAT-RE/Hygro]
drei Tandem NFAT-RE-Sequenzen upstream der
Minimalpromotor-Sequenz. pGL4.29 und
pGL4.30 sind speziell für die Untersuchung von
cAMP bzw. NFAT-Signalkaskaden entwickelt worden. Sie
können sowohl in transienten Transfektionsassays als
auch in stabilen Zelllinien verwendet werden.
Die Vektoren pGL4.26 - pGL4.30 enthalten
Markergene für das Antibiotikum Hygromycin B.
Hygromycin B wird durch die Hygromycin B
Phosphotransferase (Hygro oder Hygr) phosphoryliert
und dadurch deaktiviert. Die Selektion stabiler
eukaryontischer Zelllinien erfolgt mit Hilfe der
Expressionskassette für das Hygromycin B
Phosphotransferase kodierende Gen.
Die Vektoren sind sowohl regulär als auch mit
verschiedenen Rapid Response Luciferase
Reportergenen erhältlich (-P, -CP). Die von den
Rapid Response-Genen kodierten Proteine reagieren
schneller und intensiver auf Veränderungen der
Transkriptionsaktivität als die regulären Vektoren.
Sie sind daher gut geeignet, um
Signal-Transduktionswege zu untersuchen.
|
Vorteile |
Merkmale
|
|
Starke Leistung |
Stärkere Expression des
Reportergens – Die Gensequenzen der Luciferasen
wurden für die Expression in Säugerzellsystemen
kodon-optimiert.
|
Verbessertes Signal/
Hintergrundverhältnis |
Die Optimierung des Vektors
ergibt insgesamt ein verbessertes
Signal-/Hintergrund-Verhältnis.
|
|
Schnellere Reaktion durch Rapid Response™
Technologie |
Aufgrund
destabilisierter Luciferase-Reporter ist die
maximale Induktion der Reporterexpression bereits
nach kürzerer Zeit erreicht. Die Reporter können so
schneller und meist intensiver auf Veränderungen in
der Transkriptionsaktivität reagieren. |
|