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Pronto!TM Plus Direct System with RNA isolation
Pronto!TM Plus Direct System without RNA isolation
Pronto!TM Plus Indirect System with RNA isolation
Pronto!TM Plus Indirect System without RNA isolation
Die Pronto! TM
Plus Systems wurden von der Corning Incroporated und der Promega
Corporation für Microarray-Anwendungen entwickelt. Die Systeme
umfassen Reagenzien und Protokolle, die für Microarrays
optimiert wurden und ausgezeichnete Qualität und Zuverlässigkeit
gewährleisten.
Die Pronto! TM
Plus Systems with RNA isolation (Kat.-Nr. 40055 bzw. 40075)
beinhalten das SV Total RN Isolation System, mit dessen Hilfe
Gesamt-RNA aus unterschiedlichem Probematerial schnell und
einfach aufgereinigt werden kann.
Mit dem im Pronto! TM
Plus Direct System (40055 bzw. 40056) enthaltenen ChipShot TM
Direct Labeling System wird aus der aufgereinigten Gesamt-RNA
oder isolierter Poly(A)-RNA durch direkte Markierung mit Cy®3
und Cy®5 dCTP fluoreszierende cDNA synthetisiert.
Das Pronto! TM
Plus Indirect System (40075 bzw. 40076) enthält das ChipShot TM
Indirect Labeling System, mit dessen Hilfe aus der gereinigten
Gesamt-RNA oder isolierter Poly(A)-RNA eine Aminoallyl-cDNA
synthetisiert wird. Diese wird im Anschluss mit dem
fluoreszierenden CyDye TM
NHS-Ester konjugiert.
Die anschließende Aufreinigung der markierten cDNA erfolgt mit
dem ChipShot TM
Membrane Clean-Up System. Die isolierte cDNA ist hochrein. Eine
RNA-Amplifikation ist nicht erforderlich.
Die Pronto! TM
Hybridization Solutions wurden eigens für die
Microarray-Hybridisierung der markierten cDNA und der Ziel-DNA
entwickelt. Es stehen zwei verschiedene Hybridisierungslösungen
zur Verfügung: die Pronto! TM
Long Oligo/cDNA Hybridization Solution ist für cDNA-Arrays oder
lange Oligonukleotidarrays (>50mer) geeignet. Die Pronto! TM
Short Oligo/cDNA Hybridization Solution ist für 30-50mere
Oligonukleotide vorgesehen. Die spezielle Waschlösung minimiert
Hintergrundsignale. Die hybridisierten und gewaschenen Proben
können mit Hilfe eines Microarray-Scanners gelesen und die
Intensität der Fluoreszenz quantifiziert werden.
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