|
Calpain-Glo™ Protease Assay, 10 ml
Calpain-Glo™ Protease Assay ,
50 ml
Der Calpain-Glo™ Protease Assay ist ein
schneller und äußerst sensitiver lumineszenter Assay zur Messung der
Proteaseaktivitäten von Calpain I und II.
Calpaine gehören zur Familie der Ca2+-aktivierten
Cysteinproteasen. Sie modulieren die biologische Aktivität ihrer
Substrate durch gezielte Proteolyse und sind an der Regulation vieler Ca2+-abhängiger
zellulärer Prozesse beteiligt. Calpaine spielen eine Rolle bei der
Entstehung verschiedener Krankheiten, wie z.B. Morbus Alzheimer oder
Gewebeschädigungen bei verschiedenen Herz- und Hirnkrankheiten.
Der Calpain-Glo™-Protease Assay enthält ein luminogenes
Succinyl-Calpain-Substrat (Suc-LLVY-Aminoluciferin) in einem für Calpain
und Luciferase optimierten Puffersystem. Durch Proteolyse des
Calpain-Substrats entsteht Aminoluciferin, das sofort durch Luciferase
umgesetzt wird. Das mit der Reaktion einhergehende stabile
lichtemittierende Signal ist proportional zur Calpainaktivität.
Der Calpain-Glo™ Protease Assay ist der erste biolumineszente
Calpainassay. Seine Sensitivität ist ungewöhnlich hoch, da sie nicht von
einer Akkumulation des Calpain-Spaltprodukts abhängt. Aufgrund seiner
unmittelbaren Umsetzung durch die Luciferase wird die maximale
Sensitivität schon 5-10 min nach der Inkubation mit Calpain erreicht.
Der Calpain-Glo™ Protease Assay ist daher besonders für schnell
autolysierende Enzyme wie Calpain geeignet. Aufgrund seiner
außerordentlich hohen Reaktionsgeschwindigkeit und Sensitivität kann das
Testsystem in Hochdurchsatz-Screenings nach Calpainaktivitäten und
Calpaininhibitoren im Multiwell-Format eingesetzt werden.
|
