GloMax™ - Fragen und Antworten

1. Welche Vorteile bietet die Biolumineszenztechnologie gegenüber b-Gal-, GFP-, oder Cat-Assays?
2. Wir möchten mit Reportergenassays starten und benötigen einen schnellen, extrem sensitiven und preisgünstigen Assay mit passendem Gerät.
3. Die Signifikanz der Resultate meines Experiments soll durch den Einsatz einer internen Kontrolle (sekundärer Reporter) erhöht werden. Welcher Assay ist besonders geeignet? Welches GloMax™ Gerät empfiehlt Promega mir?
4. Kann ich den Reportergenassay in lebenden Zellen verfolgen?
5. Welcher High Throughput Assay ist ideal zur Analyse einer großen Probenanzahl, mit hoher Sensitivität und langer Halbwertszeit des Reporters?
6. Mit welchem extrem sensitiven Assay kann ich Caspasen nachweisen?

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1. Welche Vorteile bietet die Biolumineszenztechnologie gegenüber b-Gal-, GFP-, oder Cat-Assays?

• Einfache Synthese in Zellen (z.B. monomerisches Enzym, Cofaktoren)
• Keine endogene Aktivität in Zellen
• Schnelle Expression und kurze Proteinhalbwertszeit
• Nicht toxisch für Zellen
• Hohe Sensitivität beim Nachweis
• Sehr gut mess- und quantifizierbar

2. Wir möchten mit Reportergenassays starten und benötigen einen schnellen, extrem sensitiven und preisgünstigen Assay mit passendem Gerät.
   
   Starten Sie in die Welt der Reportergenassays mit dem Luciferase Assay System. Dieser Assay bietet Ihnen die Möglichkeit schnell (innerhalb von 10 Sekunden), sensitiv und linear (2000 - 10⁶ Moleküle) in einem Ansatz zu messen. Bitte beachten Sie, dass Sie Ihre Ergebnisse in einem separatem Ansatz normalisieren können.
   Hierzu benötigen Sie das Röhrchen-Luminometer GloMax™ 20/20 ohne Injektor oder alternativ mit einem Injektor.

3. Die Signifikanz der Resultate meines Experiments soll durch den Einsatz einer internen Kontrolle (sekundärer Reporter) erhöht werden. Welcher Assay ist besonders geeignet? Welches GloMax™ Gerät empfiehlt Promega mir?
   
   Mit dem Dual-Luciferase^® Reporter Assay System kann man direkt in einem Ansatz, sowohl den experimentellen Reporter, wie auch das Referenzplasmid "dual" messen. Hierdurch minimieren Sie nicht nur die Durchführung zahlreicher zeitaufwendiger Parallelansätze, sondern reduzieren auch Schwankungen innerhalb des Experiments aufgrund externer Einflüsse.
   Für diese Anwendung eignet sich besonders das Röhrchenluminometer GloMax™ 20/20 mit 2 Injektoren oder das Plattenluminometer GloMax™ 96 mit 2 Injektoren.

4. Kann ich den Reportergenassay in lebenden Zellen verfolgen?
   
   Das EnduRen™ Live Cell Substrate kann direkt zu Ihren Zellen ins Medium pipettiert werden. Das Substrat diffundiert in die Zelle und wird von zellulären Esterasen in Coelenteracin als das Substrat für die Renilla-Luciferase umgesetzt.
   Hierzu empfehlen wir das Röhrchen-Luminometer GloMax™ 20/20 ohne Injektor
   bzw. das Platten-Luminometer GloMax™ 96 ohne Injektor.

5. Welcher Assay ist ideal zur Analyse einer großen Probenanzahl im Hochdurchsatzverfahren, mit hoher Sensitivität und langer Halbwertszeit des Reporters?
   
   Die  homogenen Assays Dual-Glo™, Bright-Glo™ und Steady-Glo^® erlauben die direkte Zugabe des Luciferasereagenz, ohne dass zeitraubendes Waschen und Lysieren der Zellen erforderlich ist.
   Hierfür eignet sich besonders das Platten-Luminometer GloMax™ 96 ohne Injektoren.

6. Mit welchem extrem sensitiven Assay kann ich Caspasen nachweisen?
   
   Zum Nachweis von apoptotischen Vorgängen in der Zelle empfehlen wir Ihnen einen unserer biolumineszenten Caspase-Glo™ Assays. Zur Messung des Lichtsignals empfehlen wir Ihnen das Platten-Luminometer GloMax™ 96  ohne Injektor.