Mit dem CytoTox-ONE™ Homogeneous Membrane Integrity Assay kann sowohl die zytotoxische Wirkung von bestimmten Substanzen auf zelluläre Systeme als auch die zellvermittelte Zytotoxizität (z.B. Immunantwort) gemessen werden.
Werden Zellen durch diese Prozesse geschädigt, verliert die Zellmembran ihre Integrität, und es gelangen zytosolische Substanzen und Proteine in den extrazellulären Raum. Eines der Enzyme, welches aus dem Zellinneren austritt, ist die Laktatdehydrogenase (LDH), die Laktat zu Pyruvat oxidiert. Bei dieser Reaktion werden Reduktionsäquivalente auf NAD übertragen. Die gewonnenen Reduktionsäquivalente werden in einer weiteren enzymatischen Reaktion durch Diaphorase auf Resazurin übertragen, welches damit zu Resorufin reduziert wird. Die Reduktion zu Resorufin hat zur Folge, dass die Substanz fluoresziert und im Fluorometer gemessen werden kann (Exmax 560 nm/Emmax 590 nm).
Die Inkubationsdauer mit dem Zytotoxreagenz beträgt 10 Minuten und wird durch Zugabe eines Stopp-Puffers beendet. Das gemessene Signal ist proportional zur Menge an freigesetzter LDH und damit auch zur Zahl geschädigter Zellen.
Der sensitive Assay (Nachweis von 200–1000 Zellen/Well) wird in einer 96- oder 384-Well-Mikrotiterplatte durchgeführt, kann jedoch auch auf andere Assayformate übertragen werden. Das System ist einfach in der Handhabung, nicht radioaktiv und schnell durchzuführen. Zudem kann der Assay im gleichen Versuchsansatz mit anderen Fragestellungen wie z. B. Zellproliferation (CellTiter-Glo^® Luminescent Cell Viability Assay) oder Apoptose ( Apo-ONE^® Homogeneous Caspase-3/7 Assay) kombiniert werden.

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Nicht radioaktiv:	Fluorometrischer Nachweis
Einfach:	Messung der freigesetzten LDH direkt im Well, kein Transfer des Überstandes notwendig
Schnell:	Ergebnisse in 10 Minuten
Sensitiv:	Nachweis von ca. 1000 geschädigten Zellen im 96-Well Format und ca. 200 Zellen im 384-Well Format
Multiplexing:	Durchführung anderer zellbasierter Assays mit der gleichen Probe möglich