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Promega GmbH

Zellbasierte Assays » Apoptoseassays

Caspase-Glo® 3/7 Assay

Der Caspase-Glo® 3/7 Assay ist ein neues Testsystem zur Bestimmung von Apoptose in Zellkultur. Gemessen wird ein Lumineszenzsignal, das proportional zur Menge aktivierter Caspasen ist.
Das Caspase-Glo® 3/7 Reagenz wird direkt, ohne vorherige Waschschritte, auf die Zellen gegeben. Die Zellen werden unter Schütteln lysiert. Bereits nach einer Stunde stellt sich ein für mehrere Stunden stabiles Signal ein, das im Luminometer gemessen wird ("add and read"). Zwei enzymatische Schritte laufen bei diesem Nachweis unmittelbar hintereinander ab: Das Caspase-Glo® 3/7 Reagenz enthält ein Substrat für die Caspasen-3 und -7 (Z-DEVD-Aminoluziferin), das gespalten wird und dabei Aminoluziferin freisetzt. Das Aminoluziferin dient als Substrat für die thermostabile und besonders robuste "Ultra Glow™-Luziferase", welche eine Luziferasereaktion mit verlängerter Halbwertszeit katalysiert (Glow-Type Luziferasereaktion).
Das Ergebnis ist ein äußerst sensitiver Caspase-Nachweis mit einem exzellenten Signal/Hintergrund-Verhältnis. Der Caspase-Glo® 3/7 Assay ist schnell und einfach durchzuführen. Er kann flexibel im gewünschten Format bei Zellkulturen oder an Enzympräparationen (aufgereinigt oder rekombinant) angewendet werden (Küvette, Plattenformate 6- bis 1536-Well).

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Sensitiv: Nachweis von 20 apoptotischen Zellen (96-Well-Format), exzellentes Signal/Hintergrund-Verhältnis
Robust: Hoher Z’-Faktor, thermostabile Ultra-Glow™ Luziferase ist unempfindlich gegenüber Wirkstoffen im Zellkulturmedium und Reaktionsbedingungen
Schnell: Ergebnisse in 1 Stunde
Einfach: Direkte Zugabe des Reagenz (nur 1 Pipettierschritt, homogener Assay)
Flexibel: Adhärente- und Suspensionszellen, Enzympräparationen