Apoptoseassays im Überblick

Apoptose oder Nekrose?

Nekrose wird oft ausgelöst durch eine extreme Abweichung von physiologischen Bedingungen, wie z.B. durch physikalische, mechanische oder chemische Einflüsse.
Ein charakteristisches Zeichen dafür ist die Zerstörung der Zellmembran und eine Entzündungsreaktion.

Apoptose hingegen ist ein genetisch gesteuerter Vorgang, der entweder unter normalen physiologischen Bedingungen auftreten kann oder als Reaktion auf äußere Einflüsse. Apoptotische Zellen schrumpfen bei intakt bleibender Zellmembran. Kennzeichen der Apoptose sind die Aktivierung von Caspasen und im weiteren Verlauf die Zerteilung der DNA in charakteristische Fragmentlängen.
Apoptotische Ereignisse können mit fluoreszenz- oder luminesenz-markierten Substraten gemessen werden.

Apoptoseassays im Überblick:

Assay	Caspase-Glo® 3/7 Assay Caspase-Glo® 8 oder 9 Assay	Apo-ONE® Homogeneous Caspase 3/7 Assay	CaspACE™ FITC-VAD-FMK In Situ Marker
Instrumen- tierung	Luminometer	Fluorometer	Fluoreszenzmikroskop oder Durchflusszytometer (FACS)
Vorteile	Sensitivster Assay Stabil und robust – die thermostabile Ultra-Glow™ Luziferase ist unempfindlich gegenüber verwendeten Wirkstoffen und Reaktionsbedingungen Schnell (nach 1 Stunde maximale Sensitivität)	Flexible Inkubationszeiten (30 Minuten – 18 Stunden) – Inkubation über Nacht möglich Sensitiver als vergleichbare fluoreszente Assays Besonders geeignet für Multiplexing in Kombination mit CellTiter-Blue® Cell Viability Assay Exzellentes Signal/Hintergrund-Verhältnis	In situ Monitoring der Caspasen Aktivität – Marker ist zellpermeabel Kombinierbar mit anderen Immunomarkern (Zellpopulationsstudien möglich) Nachweis aller Pan-Caspasen Nur 30 Minuten Inkubationszeit (+ Fixierung 30 Minuten) Im Vergleich zu Annexin-V bessere batch-to-batch Konsistenz
Sensitivität	20 Zellen/96-well	625 Zellen/96-well	4000 Zellen/96-well
Ausgangs- material	Zellen, Zelllysate und Enzympräparationen	Zellen, Zelllysate und Enzympräparationen	Zellen
Zelltypen	Zelllinien, Primärzellen, adhärente und Suspensionszellen

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