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Zellbasierte Assays » Apoptoseassays im Überblick

Apoptose oder Nekrose: Selbstmord oder Tod?

Apoptoseassays im Überblick

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Nekrose wird oft ausgelöst durch eine extreme Abweichung von physiologischen Bedingungen, wie z.B. durch physikalische, mechanische oder chemische Einflüsse.
Ein charakteristisches Zeichen dafür ist die Zerstörung der Zellmembran und eine Entzündungsreaktion.
Apoptose hingegen ist ein genetisch gesteuerter Vorgang, der entweder unter normalen physiologischen Bedingungen auftreten kann oder als Reaktion auf äußere Einflüsse.
Apoptotische Zellen schrumpfen bei intakt bleibender Zellmembran. Kennzeichen der Apoptose sind die Aktivierung von Caspasen und im weiteren Verlauf die Zerteilung der DNA in charakteristische Fragmentlängen.
Apoptotische Ereignisse können mit fluoreszenz- oder luminesenz-markierten Substraten gemessen werden.

Apoptoseassays im Überblick :

Assay Caspase-Glo® 3/7 Assay
Caspase-Glo® 8 oder 9 Assay
Apo-ONE® Homogeneous Caspase 3/7 Assay CaspACE™ FITC-VAD-FMK In Situ Marker
Instrumen-
tierung
Luminometer Fluorometer Fluoreszenzmikroskop oder Durchflusszytometer (FACS)
Vorteile Sensitivster Assay

Stabil und robust – die thermostabile Ultra-Glow™ Luziferase ist unempfindlich gegenüber verwendeten Wirkstoffen und Reaktionsbedingungen

Schnell (nach 1 Stunde maximale Sensitivität)
Flexible Inkubationszeiten (30 Minuten – 18 Stunden) – Inkubation über Nacht möglich

Sensitiver als vergleichbare fluoreszente Assays

Besonders geeignet für Multiplexing in Kombination mit CellTiter-Blue® Cell Viability Assay

Exzellentes Signal/Hintergrund-Verhältnis
In situ Monitoring der Caspasen Aktivität – Marker ist zellpermeabel

Kombinierbar mit anderen Immunomarkern (Zellpopulationsstudien möglich)

Nachweis aller Pan-Caspasen

Nur 30 Minuten Inkubationszeit (+ Fixierung 30 Minuten)

Im Vergleich zu Annexin-V bessere batch-to-batch Konsistenz
Sensitivität 20 Zellen/96-well 625 Zellen/96-well 4000 Zellen/96-well
Ausgangs-
material
Zellen, Zelllysate und Enzympräparationen Zellen, Zelllysate und Enzympräparationen Zellen
Zelltypen Zelllinien, Primärzellen, adhärente und Suspensionszellen

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