La technologie NanoLuc™ :
Plus petite, plus lumineuse et d'une extrême sensibilité
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Extrême luminosité :
- La sensibilité optimisée permet de détecter des événements physiologiques plus pertinents
- Sur cellules, le signal est de 80 à 240 fois supérieur à la firefly (luc2)
Petite taille sans équivalent (19kD) :
- Nettement plus petit que la Firefly ou la Renilla, ou que les GFP
- Permet des applications dans lesquelles les tailles des gènes ou des protéines sont restrictives, telles que la libération de particules virales et les protéines de fusion
Cinétique des signaux lumineux :
- Convient généralement à toutes les capacités de traitement de laboratoire
- S'adapte facilement à l'automatisation de laboratoire (par ex., HTS)
Haute stabilité physique :
- Robuste dans les conditions expérimentales (température, pH, etc.)
- Réduction des faux-positifs dans le criblage de banque de composés
Grande polyvalence :
- Format standard avec lyse cellulaire
- Sécrétion dans le milieu sans lyse cellulaire
- Jouez sur la stabilité de votre protéine grâce à une séquence de dégradation (-PEST)
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“For the past 25 years, firefly luciferase has served as the standard in bioluminescent reporter technology. Through series of incremental advancements in both reporter structure and reagent formulation, this native bioluminescent chemistry has been transformed into a reliable and highly sensitive indicator of genetic regulation. To further augment the capabilities of bioluminescent detection, we have engineered a novel luciferase and corresponding assay chemistry.
This new reporter technology can supply ample luminescence in challenging biological systems where transgene expression is low, sample size is restricted, or transgene length is constrained. Furthermore, the favorable physical properties and bright luminescence are particularly suitable for emerging methods in cellular analysis, such as luminescence imaging and energy transfer”.
Keith Wood, R&D director
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Les performances de NanoLuc™
NanoLuc™ Luciferase is offered in a collection of 12 different vector configurations to best suit the intended use. These products offer :
- Nluc gene sequence codon optimized and cleansed of most transcription factor binding sites, promoter modules, splice sites, and other regulatory sequences.
- Standard, destabilized, or secreted forms of luciferase available to match the most appropriate assay format.
- pGL4-based backbone for easy sequence transfer from existing plasmids
- Use a standard plasmid with Multiple Cloning Site (MCS) to clone promoters or Minimal Promoter-containing plasmid to clone response elements
- Hygromycin marker available for cell line creation
- CMV controls available in standard (intracellular) and secreted format
- NF-kB response element plasmid with destabilized NlucP for study of the NF-kB pathway
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CRE response in HEK293 cells
Genetic reporter constructs where made using the indicated luciferase under control of the cAMP response element (CRE) and transfected into HEK293 cells. Following induction with forskolin, the luciferase expression was detected with the Nano-Glo™ or ONE-Glo® Luciferase Assay Systems on a GloMax® 96 Microplate Luminometer. NanoLuc™ Luciferase demonstrates brighter signals than either standard or destabilized firefly luciferase. The PEST destabilization domain increases the induction ratio for both luciferases and provides maximal response when used with NanoLuc. In all cases the EC50 for the induction remains relatively unchanged.
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HEK293 cells / CRE response element
The CRE-responsive expression of secreted NanoLuc™ Luciferase (secNluc) was measured either in cells induced with forskolin or in DMSO-control over a period of 6 hours. A media change was performed at t=0. The secreted format allows the measurement of reporter activation kinetics without destroying the sample. Signals were measured with a GloMax® 96 Microplate Luminometer.
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Nano-Glo™ Assay Reagent
Nano-Glo™ Luciferase Assay System has been developed to provide optimal activity with the NanoLuc™ Luciferase. This assay reagent offers :
- Add-Mix-read simplicity with integral lysis components
- Glow signal kinetics with an approximately 2 hour signal half-life
- Liquid substrate allows easy reagent preparation
- Minimal autoluminescense
- Room temperature stability through one work day
- Four sizes availabe : 10mL | 10x10mL | 100mL | 10x100mL
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Nano-Glo Detection Reagent
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- Furimazine substrate: novel coelenterazine analog (ATP independent)
- t½ > 2 hours at room temperature
- Very low autoluminescence
- Stable at room temperature for several hours
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(Re)Découvrez gratuitement nos derniers webinars :
Luciferase Next Generation :
Plus petite, plus lumineuse et d'une extrême sensibilité
Les webinars Promega sont des conférences en lignes sur mesure à but non lucratif, qui couvrent une vaste gamme de sujets scientifiques. Ces webinars sont gratuits, mais necessite une inscription pour y assiter en direct et échanger avec le conférencier. Vous pouvez cependant à tous moment après le webinar vous rendre sur promega.com/webinars pour visionner la vidéo du webinar ou télécharger le PDF de la présentation.
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Introduction à NanoLuc™ :
La nouvelle génération de luciférase de Promega est plus petite (19kDa), plus polyvalente que toutes les autres enzymes actuellement disponibles. Ses caractéristiques offrent de nouvelles perspectives aux utilisateurs de gènes rapporteurs sur des applications biologiques complexes exigeant une plus haute sensibilité.
- Les propriété de NanoLuc™ Luciferase & Nano-Glo™ Assay System
- La polyvalence de NanoLuc™ Luciferase : standard, sécrétée ou déstabilisée (-Pest)
- L'utilisation de NanoLuc dans plusieurs applications cellulaires dont le BRET
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Applications de NanoLuc™ :
La nouvelle génération de luciférase de Promega est plus petite (19kDa), plus polyvalente que toutes les autres enzymes actuellement disponibles. Ses caractéristiques offrent de nouvelles perspectives aux utilisateurs de luciférases classiques sur des applications biologiques complexes exigeant une plus haute sensibilité, une plus grande stabilité ou plus grande luminescence. Ce webinar introduira NanoLuc™ et ses caractéristiques puis se focalisera sur l'utilisation de cette nouvelle luciférase en tant que protéine de fusion pour :
- Le suivi de la translocation et la dégradation des protéines
- L'étude des interactions protéine-protéines
- L'études de biosenseurs intracellulaires
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Produit
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Cdtm.
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Référence
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Prix
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Nano-Glo™ Luciferase Assay
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Protocol
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10ml
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N1110
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84 €
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Nano-Glo™ Luciferase Assay
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Protocol
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100ml
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N1120
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652 €
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Nano-Glo™ Luciferase Assay
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Protocol
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10x10ml
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N1130
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634 €
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Nano-Glo™ Luciferase Assay
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Protocol
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10x100ml
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N1150
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sur demande
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