Die Single Step (KRX) Competent Cells
gewährleisten eine effiziente Transformation und
kontrollierte Proteinexpression in
E.coli. Die Transformationseffizienz liegt
bei mehr als 108 cfu/μg und ist damit
vergleichbar mit anderen hochkompetenten
Transformationsstämmen. Die Zellen sind in
Einheiten von 5 x 200 µl oder 20 x 50 µl
erhältlich.
KRX ist ein Derivat des E.coli
K12-Stammes, das eine Kopie des T7
RNA-Polymerase-Gens und des Rhamnose Promotors
rhaPBAD enthält. Der rhaBAD Promotor unterliegt
einer Katabolitrepression durch Glukose. Er wird
durch Zugabe von Rhamnose ins Medium aktiviert,
was eine ausgezeichnete Kontrolle der
Proteinexpression ermöglicht. (Rhamnose wird von
den KRX-Zellen nicht metabolisiert, da die
Genregion der entsprechenden Enzyme deletiert
und durch das T7 RNA-Polymerase-Gen ersetzt
wurde.) Eine unerwünschte Proteinexpression vor
der Induktion tritt signifikant seltener auf als
bei Abkömmlingen des Stamms BL21(DE3). Diese
Eigenschaft ermöglicht die Expression von
Proteinen, die für E. coli toxisch sind.
KRX Genotyp: [F′‚ traD36, ΔompP, proA+B+, lacIq,
Δ(lacZ)M15] ΔompT, endA1, recA1, gyrA96 (Nalr),
thi-1, hsdR17 (rk−, mk+), e14− (McrA−), relA1,
supE44, Δ(lac-proAB), Δ(rhaBAD)::T7 RNA
polymerase.