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einfach
keine Deproteinierung, keine Zentrifugation
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schnell
geringe Inkubationszeit durch lumineszenten
Ansatz
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physiologisch relevant
Messung direkt im Zellkulturgefäß
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sensitiv
weniger Zellen notwendig als in konventionellen
Assays
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automatisierbar
Mit dem luminometrischen GSH/GSSG-Glo™ Assay können
Sie einfach und schnellphysiologisch relevante
Veränderungen des Glutathion-Levels messen. Die
oxidierte Form des Glutathion ist ein Zeichen
für zellulären Stress, kann zu Apoptose und
Zelltod führen und wird für toxikologische
Bestimmungen genutzt. Mit dem Assay kann daher
die Wirkung von Medikamentenvorläufern auf die
zellulären Glutathion-Level gescreent werden.
Assay für die direkte Anwendung im
Zellkulturgefäß
Der Assay erlaubt die Quanitifizierung von drei
Parametern: Gesamt-Glutathion, oxidiertes Glutathion
(GSSG) und das Verhältnis von reduziertem zu
unreduziertem Glutathion (GSH:GSSG). Die Reagenzien
können direkt in die Zellkulturgefäße gegeben
werden. Da die Zellen nicht transferiert werden,
minimiert sich der Verlust von GSH und GSSG im
Vergleich zu konventionellen Assays. Der
GSH/GSSG-Glo™ Assay lässt sich einfach an 96- und
384-well-Formate anpassen.
Der Assay koppelt die Reaktion der
Glutathion-S-Transferase (GST) an die
lichterzeugende Luciferin-Reaktion. Dabei löst die
GST eine nicht-funktionelle Gruppe vom Luciferin und
koppelt diese an das reduzierte Glutathion. Das
freigewordene Luciferin geht in die
Luciferase-Reaktion ein, das Lichtsignal ist dabei
direkt proportional zu den GSH-Werten in der Zelle.
Anwendungen:
Bestimmung der physiologischen Glutathion-Level