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Apoptoseassays im überblick
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Nekrose oder Apoptose?
Nekrose wird oft ausgelöst durch eine extreme
Abweichung von physiologischen Bedingungen, wie z.B.
durch physikalische, mechanische oder chemische
Einflüsse.
Ein charakteristisches Zeichen dafür ist die
Zerstörung der Zellmembran und eine
Entzündungsreaktion.
Apoptose hingegen ist ein genetisch gesteuerter
Vorgang, der entweder unter normalen physiologischen
Bedingungen auftreten kann oder als Reaktion auf
äußere Einflüsse. Apoptotische Zellen schrumpfen bei
intakt bleibender Zellmembran. Kennzeichen der
Apoptose sind die Aktivierung von Caspasen und im
weiteren Verlauf die Zerteilung der DNA in
charakteristische Fragmentlängen.
Apoptotische Ereignisse können mit fluoreszenz- oder
luminesenzmarkierten Substraten gemessen werden.
Apoptoseassays im überblick:
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Assay |
Caspase-Glo® 3/7 Assay
Caspase-Glo® 8 oder 9 Assay |
Apo-ONE® Homogeneous Caspase 3/7
Assay |
CaspACE™ FITC-VAD-FMK In Situ Marker |
Instrumen-
tierung |
Luminometer |
Fluorometer |
Fluoreszenzmikroskop oder
Durchflusszytometer (FACS) |
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Vorteile |
Sensitivster Assay
Stabil und robust: die thermostabile
Ultra-Glow™ Luziferase ist unempfindlich
gegenüber verwendeten Wirkstoffen und
Reaktionsbedingungen
Schnell (nach 1 Stunde maximale
Sensitivität)
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Flexible Inkubationszeiten (30 Minuten oder
18 Stunden Inkubation über Nacht möglich)
Sensitiver als vergleichbare fluoreszente
Assays
Besonders geeignet für Multiplexing in
Kombination mit CellTiter-Blue® Cell
Viability Assay
Exzellentes Signal/Hintergrund-Verhältnis
|
In situ Monitoring der Caspasen Aktivität -
Marker ist zellpermeabel
Kombinierbar mit anderen Immunomarkern
(Zellpopulationsstudien möglich)
Nachweis aller Pan-Caspasen
Nur 30 Minuten Inkubationszeit (+ Fixierung
30 Minuten)
Im Vergleich zu Annexin-V bessere
batch-to-batch Konsistenz
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Sensitivität |
20 Zellen/96-well |
625 Zellen/96-well |
4000 Zellen/96-well |
Ausgangs-
material |
Zellen, Zelllysate und
Enzympräparationen |
Zellen, Zelllysate und
Enzympräparationen |
Zellen |
|
Zelltypen |
Zelllinien,
Primärzellen, adhärente und
Suspensionszellen |
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